酶解法是 ACE 抑制肽的常見提取方法,目前多數 采用單酶水解的方式,但得到的 ACE 抑制肽的抑制效 果有限,復合酶作用于蝦類蛋白能夠有助于提高水解 產物的抑制活性。以南美白對蝦蝦頭為原料,取動、植 物和微生物來源的共 11 種蛋白酶進行單酶及復合酶 篩選,以水解度和 ACE 抑制率作為測定指標。電熱恒溫鼓風干燥 箱(DHG‐9023A):上海齊欣科學儀器有限公司;脂肪測 定儀(SZF‐06A):青島精誠儀器儀表有限公司;紫外‐可 見分光光度計(SH‐6600):江蘇盛奧華環保科技有限 公司。
在相同酶活的條件下,酶解產物 ACE 抑制率的差異可能是由于不同蛋白酶具有不同 的特異性,水解出的肽段活性位點不同而造成的。以黃斑海蜇為原料,經胰蛋白酶水解后所得的酶 解產物 ACE 抑制活性最強。而水解度的差異取決于 酶切位點和蝦頭底物的結合能力,也會依據各蛋白酶 最適水解條件不同,受到溫度、酸堿度的影響。綜上, 選取堿性蛋白酶、胰蛋白酶、風味蛋白酶、α‐糜蛋白酶 4 種蛋白酶參與復合酶的篩選。